I. MỤC ĐÍCH

• Mô tả và hướng dẫn cách thực hiện xét nghiệm phản ứng CRP bằng phương pháp chẩn đoán huyết thanh.

II. PHẠM VI ÁP DỤNG

• Áp dụng tại Khoa xét nghiệm Vi sinh - Bệnh viện đa khoa Tỉnh Quảng Ninh.

III. TÀI LIỆU VIỆN DẪN

• Quyết định 26/QĐ-BYT ban hành ngày 03/01/2013 về việc ban hành tài liệu “Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành Vi sinh Y học”
• Bộ Y tế, Giáo trình thực hành Vi sinh vật, NXB Y học, 2004.

IV. TRÁCH NHIỆM

• Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.
• Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.
• Cán bộ QLCL, tổ trưởng chuyên môn chịu trách nhiệm giám sát việc tuân thủ quy trình

V. ĐỊNH NGHĨA, THUẬT NGỮ, CHỮ VIẾT TẮT

HD	Hướng dẫn
QC	Quality control
QLCL	Quản lý chất lượng
QTKT	Quy trình kỹ thuật
VK	Vi khuẩn
VS	Vi sinh

VI. NGUYÊN LÝ

• Thuốc thử CRP là một hệ thống treo các hạt latex gắn gamma globulin huyết thanh kháng CRP đặc hiệu ở người. Khi CRP có trong mẫu sẽ xuất hiện sự ngưng kết, cho thấy hàm lượng của CRP bằng hoặc lớn hơn 6 mg/l khi không pha loãng mẫu trước.

VII. TRANG THIẾT BỊ VÀ VẬT TƯ

7.1. Trang thiết bị

• Đồng hồ
• Micropipet
• Máy ly tâm thường
• Đèn
• Máy lắc

7.2. Dụng cụ hóa chất, vật tư tiêu hao

Ống lấy bệnh phẩm

Bơm tiêm

Bông

Cồn 90°(vệ sinh dụng cụ)

Panh

Khay đựng bệnh phẩm

Hộp vận chuyển bệnh phẩm

Hóa chất chính CRPslide( C- creactive protein)

Khấu hao sinh phẩm cho chạy chứng và kiểm tra chất lượng

Đầu côn vàng

Acid ngâm rửa

Ống nghiệm thủy tinh

Mũ

Khẩu trang

Găng tay

Găng tay xử lý dụng cụ

Quần áo bảo hộ

Bút viết kính

Bút bi

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

Cồn sát trùng tay nhanh

Dung dịch nước rửa tay

Khăn lau tay

Giấy trả kết quả xét nghiệm

7.3. Mẫu bệnh phẩm

• Mẫu thử là huyết thanh. Huyết tương không nên được sử dụng. Mẫu phải được bảo quản để tránh sự tiêu máu và bị nhiễm. Mẫu huyết thanh có thể lưu trữ ở 2-8^oC. Nếu muốn lưu trữ lâu hơn cần phải giữ mẫu ở -20 ^oC.

VIII. NỘI DUNG

8.1. Chuẩn bị

• Chuẩn bị mẫu bệnh phẩm: Lấy mẫu theo đúng quy định trong Sổ tay lấy mẫu – Khoa Vi sinh
• Đưa tất cả các thành phần của kít thử và mẫu về nhiệt độ phòng trước khi tiến hành xét nghiệm
• Kiểm tra thông tin bệnh nhân, bệnh phẩm.

• Đánh dấu tên bệnh nhân trên 1 vùng phản ứng.

8.2. Thực hiện xét nghiệm

• Lắc nhẹ lọ dung dịch thử chứa hạt latex – R1 sao cho dung dịch ở dạng đồng nhất.
• Nhỏ một giọt( 40) dung dịch thử chứa hạt latex – R1 vào vùng phản ứng. Sau đó dùng ống hút 1 lần thêm 1 giọt huyết thanh/ huyết tương(40) vào.
• Trộn đều hai dung dịch.
• Lắc liên tục trong vòng 2 phút và đọc dưới ánh đèn.

IX. DIỄN GIẢI KẾT QUẢ

• Âm tính: hỗn hợp sau phản ứng là dung dịch đồng nhất
• Dương tính: xuất hiện sự ngưng kết. Có các hạt màu trắng ngưng kết lại.

X. KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG

10.1 Chất lượng bệnh phẩm

• Bệnh phẩm phải được làm ngay sau khi lấy mẫu. Nếu không thực hiện xét nghiệm ngay thì phải bảo quản theo quy định.
• Bệnh phẩm không bị tán huyết.
  1. Chất lượng dụng cụ xét nghiệm và kít thử
•  Kít thử được bảo quản đúng quy định, còn nguyên vỏ và thời gian sử dụng.

XI. AN TOÀN

Áp dụng các biện pháp an toàn chung khi xử lý mẫu và thực hiện xét nghiệm theo quy trình về an toàn xét nghiệm mã hiệu VS.QTQL.10.

XI. LƯU Ý

• Sử dụng mẫu huyết thanh tươi thu được sau khi quay ly tâm máu.
• Nếu không tiến hành thử ngay thì huyết thanh phải được bảo quản từ 2 - 8^oC và không quá 3 ngày. Nếu muốn để lâu hơn phải đóng đá.
• Như tất cả các test thử thuộc huyết thanh học. tán huyết hoặc huyết thanh hỏng sẽ không được sử dụng.
• Không sử huyết tương.

XII. HỒ SƠ LƯU

• Lưu trữ các biểu mẫu phiếu QC theo đúng quy định của khoa.

XIII. TÀI LIỆU LIÊN QUAN

Tên tài liệu	Mã tài liệu
Quy trình thu thập và xử lý mẫu bệnh phẩm
Sổ tay hướng dẫn lấy mẫu bệnh phẩm
Quy trình trả kết quả xét nghiệm Khoa Vi Sinh
Hướng dẫn sử dụng kit CRP