I. MỤC ĐÍCH

Quy trình nhằm phát hiện chủng vi khuẩn kháng thuốc cư trú ở người.

II. PHẠM VI ÁP DỤNG

Quy trình này được áp dụng để kiểm tra sự hiện diện của các vi sinh vật trong không khí tại các khoa phòng trong Bệnh viện Đa khoa tỉnh Quảng Ninh.

III. TÀI LIỆU VIỆN DẪN

• Hướng dẫn quy trình kỹ thuật chuyên ngành vi sinh vật y học – Bộ Y tế 01/2013

IV. TRÁCH NHIỆM

Nhân viên xét nghiệm khoa vi sinh- Bệnh viện đa khoa tỉnh Quảng Ninh có trách nhiệm thực hiện theo đúng quy trình

Người thực hiện: cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên nghành vi sinh, làm việc tại khoa Vi sinh- Bệnh viện đa khoa tỉnh Quảng Ninh

V.ĐỊNH NGHĨA, THUẬT NGỮ, CHỮ VIẾT TẮT

Định nghĩa, thuật ngữ:

• Tài liệu: là các loại văn bản pháp quy hoặc có tính pháp quy dùng làm căn cứ để xử lý,
• Kiểm tra: Là sự xem xét sự phù hợp của tài liệu với các nội dung và yêu cầu của tiêu chuẩn
• Phê duyệt: Xác nhận của người có thẩm quyền về sự phù hợp và tính hiệu lực của tài liệu trong hệ thống
• Lần ban hành: là lần phát hành ra một tài liệu mới, được bắt đầu từ 01, mỗi lần ban hành tiếp theo sẽ tăng thêm một đơn vị.
• Lần sửa đổi: là số lần phát hành một trang tài liệu sau khi sửa đổi, được bắt đầu từ 01, mỗi lần sửa đổi tiếp theo sẽ tăng thêm một đơn vị.

Chữ viết tắt:

EQAS:	External quality assessment scheme
KTV:	Kỹ thuật viên
TP. QLCL:	Trưởng phòng quản lý chất lượng
QC:	Quality control
QT:	Quy trình

VI. NGUYÊN LÝ

VII. TRANG THIẾT BỊ VÀ VẬT TƯ

Phương tiện, hóa chất

Phương tiện, hóa chất như dưới đây hoặc tương đương.

Trang thiết bị

- Kính hiển vi quang học

- Tủ an toàn sinh học cấp 2

- Tủ ấm thường

- Tủ ấm CO2

- Nồi hấp ướt

- Tủ an toàn sinh học 2

- Máy lắc

- Ống độ đục chuẩn McFarland 0.5

Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

STT	Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao	Đơn vị	Số lượng
1	Lọ lấy bệnh phẩm	Lọ
2	Que cấy	Cái
3	Lam kính	Cái
4	Dầu soi kính	ml
5	Xylen lau kính	ml
6	Nước muối sinh lý	ml
7	Thuốc nhuộm đỏ Fucsin	ml
8	Thuốc nhuộm tím Gentian	ml
9	Cồn tẩy 96 độ	ml
10	Lugol	ml
11	Thuốc nhuộm Xanh Methylen	ml
12	Môi trường thạch máu thường	Đĩa
13	Khoanh giấy kháng sinh	Cái
14	Thạch Muller Hinton	Đĩa
15	Bơm kim tiêm	Cái
16	Bông	Kg
17	Cồn 90 độ (vệ sinh dụng cụ)	ml
18	Đèn cồn	Cái
19	Panh	Cái
20	Khay đựng bệnh phẩm	Cái
21	Hộp vận chuyển bệnh phẩm	Cái
22	Mũ	Cái
23	Khẩu trang	Cái
24	Găng tay	Đôi
25	Găng tay xử lý dụng cụ	Đôi
26	Quần áo	Bộ
27	Ống nghiệm thủy tinh	Ống
28	Bút viết kính	Cái
29	Bút bi	Cái
30	Bật lửa	Cái
31	Sổ lưu kết quả xét nghiệm	Tờ
32	Cồn sát trùng tay nhanh	ml
33	Dung dịch nước rửa tay	ml
34	Khăn lau tay	Cái
35	Giấy trả kết quả xét nghiệm	Tờ
36	QC
37	EQAS

 * Ghi chú:

- Chi phí nội kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình nội kiểm (QC) là 1/10 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lượng ≥ 10 mẫu cho 1 lần tiến hành kỹ thuật).

- Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/200 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (với số lần ngoại kiểm trung bình 2 lần/1 năm).

VIII. NỘI DUNG

Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh.

Tiến hành kỹ thuật

- Cấy bệnh phẩm lên môi trường phân lập và môi trường canh thang tăng sinh

- Ủ ấm qua đêm

- Bắt khuẩn lạc nghi ngờ

- Nhuộm soi, thử nghiệm các tính chất sinh vật hóa học đơn giản và định danh bằng bộ API

- Thử nghiệm kháng sinh đồ khoanh giấy khuếch tán.

Lưu ý

• Quy trình này chỉ áp dụng tìm vi khuẩn hiếu kỵ khí tùy tiện dễ nuôi cấy, không áp dụng cho các vi khuẩn kỵ khí bắt buộc. Kết quả âm tính không có nghĩa là không có vi khuẩn gây bệnh trong bệnh phẩm mà là không tìm thấy căn nguyên vi khuẩn gây bệnh có thể phân lập được bằng quy trình nuôi cấy này.
• Bệnh phẩm lấy, vận chuyển và bảo quản không đúng yêu cầu có thể đưa đến kết quả âm tính hoặc dương tính giả

IX. DIỄN GIẢI KẾT QUẢ

- Dương tính: Phân lập và định danh được vi khuẩn kháng thuốc liên quan đến nguồn gốc nhiễm trùng bệnh viện như MRSA, VRE... Trả kết quả tên vi khuẩn đến mức độ loài và đặc tính kháng thuốc của vi khuẩn.

- Âm tính: Không tìm thấy hoặc không phân lập được vi khuẩn gây bệnh

X. KIỂM TRA CHẤT LƯỢNG

• Đảm bảo không bị lây nhiễm

XI. AN TOÀN

• Phải sử dụng bảo hộ cá nhân đầy đủ;
• Các kỹ thuật phải được tiến hành trong tủ an toàn sinh học.

XII. HỒ SƠ LƯU

XIII. TÀI LIỆU LIÊN QUAN